Rossi et al.
利用微流控装置检测血流中血小板沉积与纤维蛋白生成以快速测定Xa抑制剂活性
背景
服用直接口服抗凝药（DOACs）的患者在出现大出血、卒中或急诊手术后常面临复杂临床状况。全血DOAC浓度快速检测可为临床决策提供关键依据, 如是否需要逆转DOAC作用。
方法
我们开发了一种一次性贮存稳定的八通道微流控装置，用于评估静脉血栓栓塞或房颤患者的Xa因子（FXa）抑制剂（阿哌沙班或利伐沙班）水平。该检测装置在四种离体条件下同步监测胶原/组织因子（TF；壁面剪切率200 s⁻¹）介导的全血凝固动态过程：未处理对照组、高剂量Xa因子抑制组、低剂量/高剂量FXa逆转剂（andexanet alfa）干预组。通过双色落射荧光显微镜实时观测纤维蛋白与血小板沉积动力学，并采用LC-MS/MS法测定血浆DOAC浓度作为参照。
结果
采用DOAC加标的健康志愿者血液验证显示：装置检测性能良好（DOAC半数抑制浓度IC50约120 nM），且证实添加至健康供血者血液中的andexanet alfa对血小板和纤维蛋白信号无脱靶效应。对患者全血进行15-25分钟监测（平均运行时间17分钟）可计算出2-500 nM范围内的功能性DOAC浓度，该结果与LC-MS/MS测定的阿哌沙班/利伐沙班浓度高度相关（判定系数R²分别为0.7和0.9）。未发现DOAC服药患者存在血小板功能障碍。以100 nM DOAC浓度为临界值时，阿哌沙班与利伐沙班的受试者工作特征曲线下面积（AUC）分别为0.881和0.933。
结论
全血微流控检测技术可快速评估治疗浓度范围内的DOAC水平。
